This is an example of a HTML caption with a link.
Danh mục tin tức
Thống kê
Tổng truy cập
1179651
Trong ngày
134
Online
5

Thời gian đăng: 29/03/2018 | 15:08

Những điều cần biết khi lựa chọn máy Real-Time PCR cho phòng thí nghiệm của bạn

Phòng thí nghiệm của bạn chưa có máy Real-Time PCR và bạn đang quan tâm đến sản phẩm này?

Phòng thí nghiệm của bạn đang dùng máy Real-Time PCR của một Hãng nào đó (Lifetechnologies/ AppliedBiosystems, Biorad, ...) và muốn tìm hiểu thêm về dòng máy này của những Hãng khác? 

Những thông tin cơ bản dưới đây sẽ hỗ trợ để bạn tìm được máy Real-Time PCR phù hợp nhất với yêu cầu của phòng thí nghiệm và công việc của bạn

 
 
Một máy Real-Time PCR thường được quan tâm nhất ở 3 phần: hệ quang học (thực hiện chức năng Real-Time), block gia nhiệt và phần mềm điều khiển phân tích .
 
1.Hệ quang học:
 
Là bộ phận quan trọng nhất, quyết định toàn bộ kết quả xét nghiệm, 2 điểm cần quan tâm nhất ở bộ phận này là công nghệ đọc và số tác nhân phát hiện cùng lúc.
 
Hiện nay, có 3 công nghệ đọc thông dụng nhất là CCD, Photodios và Photomultiplier tube (PMT). Các dòng thiết bị sử dụng công nghệ Photodios hiện nay không còn xuất hiện ở Việt Nam (Bio Rad) hoặc đã ngừng sản xuất (Eppendorf)
 
Công nghệ PMT là công nghệ có 1 đầu đọc gọi là đầu đọc PMT quét qua từng giếng để thu tín hiệu realtime do đó việc thu nhận tín hiệu realtime ở các giếng sẽ không diễn ra cùng 1 thời điểm.
 
Công nghệ này hiệu chỉnh phần cứng, không cần hiệu chỉnh thường xuyên, sau 1 thời gian sẽ có hiện tượng lệch giữa đầu đọc PMT và các giếng trên bock nhiệt và không thể hiệu chỉnh bởi người sử dụng mà phải gửi về hãng để hiệu chỉnh. Việc không hiệu chỉnh định kỳ có thể dẫn đến sự không chính xác trong kết quả.
 
Công nghệ CCD có thể hiểu đơn giản là công nghệ thu nhận tín hiệu Real-Time ở tất cả các giếng cùng 1 thời điểm.
 
Công CCD cần hiệu chỉnh định kỳ, tuy nhiên việc hiệu chỉnh với của CCD rất đơn giản bởi người sử dụng. Bô hóa chất hiệu chỉnh cung cấp kèm theo máy có thể sử dụng để hiệu chuẩn ít nhất 5 lần theo khuyến cáo của nhà sản xuất. Việc hiệu chỉnh định kỳ sẽ đảm bảo kết quả được chính xác nhất.
 
Số tác nhân phát hiện cùng lúc càng nhiều thì càng đỡ tốn kém về chi phí và thời gian. Hiện nay, khá nhiều kit phát hiện 2-3 tác nhân cùng lúc, do đó yêu cầu máy real-time PCR phải phát hiện được số tác nhân tương ứng.
 
Các hệ thống phổ biến trên thị trường hiện nay gồm có: Stepone Plus, 7300, 7500, 7500 Fast, 7500 Fast Dx  của hãng Lifetechnologies/AppliedBiosystems; MX 3000P, MX 3005P, của Agilent; Rotogene Q6000 của Qiagen (các dòng máy Real-Time PCR của Bio-Rad khá phổ biến nhưng Hãng hiện nay đã tạm ngừng hoạt động tại thị trường Việt Nam).
 
2. Block gia nhiệt (PCR):
 
Cũng giống như các máy PCR thông thường hiện nay, tuy nhiên có một số lưu ý:
 
Tốc độ gia nhiệt càng nhanh thì càng hạn chế các sản phẩm không đặc hiệu, thời gian thực hiện nhanh. Hiện nay trên thị trường có những dòng máy có chức năng Fast có thể chạy 1 chương trình với thời gian 40 phút.
 
Độ phân chính xác nhiệt độ giữa các giếng. Thông thường các hệ thống có độ chính xác ± 0.25oC, độ đồng đều giữa các giếng ± 0,25oC. Để có thể thực hiện được chức năng phân tích đường cong tan chảy độ phân giải cao (HRM) thì yêu quá trình gia nhiệt phải đạt độ chính xác rất cao.
 
 Loại tube sử dụng phải thông dụng. Phổ biến hiện nay sử dụng loại tube 0.2ml hoặc 0,1 ml. 1 phản ứng Realtime PCR hiện nay thể tích thường 20 – 50 µl.
 
Thể tích phản ứng phải phù hợp với các hóa chất thông dụng trên thị trường, các loại máy sử dụng các loại tube 25 µl và thể tích phản ứng nhỏ hơn 20 µl sẽ hạn chế trong việc lựa chọn hóa chất, rất khó tối ưu và khó thao tác.
 
3.Phần mềm điều khiển và phân tích
 
Phần mềm phải hiệu quả và dễ sử dụng. Các phần mềm của MxPro,  Bio-Rad,  SDS v1.4 (ABI) là các phần mềm dễ sử dụng và được đánh giá cao.
 
 
4.  Thiết kế hệ thống
 
Bộ phận luân nhiệt và bộ phận quang học liền 1 khối không tách rời thành 2 module để đảm bảo tính đồng bộ và tính chính xác của hệ thống. Các Model đáp ứng tiêu chí này gồm Stepone plus, 7300, 7500, 7500 Fast, 7500 Fast Dx, Mx3000P, Rotor-Gene, Roche. Máy của Bio-Rad, Eppendorf là sự kết hợp của 2 module là bộ phận PCR và bộ phận quang học, 2 bộ phận này có thể tách rời nhau.
 
Trên đây là những thông tin cơ bản nhất về máy Real-Time PCR. Để biết thêm chi tiết hoặc có bất kỳ câu hỏi gì xin vui lòng liên lạc theo số điện thoại 0908888483 hoặc 0902880405

Đối tác dưới